第三节胶体金的制备办法

  胶体金溶液的制备有许多种办法，其间最常用的是化学复原法，根本的原理是向必定浓度的金溶液内参加必定量的复原剂使金离子变成金原子。现在常用的复原剂有：白磷、乙醇、过氧化氢、硼氢化钠、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等，下面别离介绍制备不同巨细颗粒的胶体金溶液。

  制备胶体金的成功与失利除试剂要素以外玻璃器皿清洁是最重要的一步。假如玻璃器皿内不洁净或许有尘埃落入就会搅扰胶体金颗粒的生成，构成的颗粒巨细不一，色彩微红、无色或混浊不通明。咱们的经历是制备胶体金的一切玻璃器皿先用自来水把玻璃器皿上的尘埃流水冲刷洁净，参加清洁液（重铬酸钾1000g,参加浓硫酸2500ml，加蒸馏水至10000ml）浸泡24h，自来水洗净清洁液，然后每个玻璃器皿用洗洁剂洗3～4次，自来水冲刷掉洗洁剂，用蒸馏水洗3～4次，再用双蒸水把每个器皿洗3～4次，烤箱枯燥后备用。经过此办法的处理玻璃器皿不需要硅化处理，而直接制备胶体金。也可用现已制备的胶体金溶液，用平等大不颗粒的金溶液去包被所用的玻璃器皿的外表，然后弃去，再用双蒸水洗净，就能够运用，这样效果更好，因为减少了金颗粒的吸附效果。

  （1）一切制造试剂的容器均按以上要求酸处理洗净，制造试剂用双蒸馏水或三蒸馏水。

  （2）氯化金（HauCl4水溶液的制造：将lg的氯化金一次溶解于双蒸水中配成1%的水溶液。放在4”c冰箱内保存长达几个月至1年左右，仍保持稳定。

  （3）白磷或黄磷溶液的制造：白磷在空气中易焚烧，要分外当心操作。把白磷在双蒸水中切成小块，放在滤纸上吸于水份后，敏捷放入已准备好的中去，悄悄摇摆，等彻底溶解后即得饱和溶液。贮藏于棕色密闭瓶内，放在阴凉处保存。

  （3）加热煮欢腾，敏捷参加0.5ml20%白磷的饱和溶液，振动数分钟至溶液呈现橙赤色时即成。胶体金的颗粒直径为3nm左右，巨细较均匀。

  （3）参加1/5饱和度的白磷溶液1ml（1份白磷4份），在室温振动约15min ，溶液呈红褐色，再加热至典型的葡萄酒赤色，加热可使蒸腾，胶体金液体内过量的白磷通入空气后被氧化，此办法取得胶体金颗粒的直径在5～12nm之间。

  运用上述办法添加复原次数使金颗粒直径不断增大，二者之间的联系见表5-1。

  此办法首要长处是简化了制备不同巨细的颗粒胶体金的手续和其它试剂的制造,经济、简略易操作。别的，在屡次复原进程中氯化金不再构成新的金颗粒，只是在原先金粒子根底上使它的直径变大。第一次金颗粒起着“晶核”的效果。因为这一特色，制备的金颗粒相对均匀共同。

  （3）加双蒸水至100ml，加热至溶液变为通明赤色停止。胶体金颗粒直径为8～13nm。

  此办法是由Frens在1973年创建的，制备程序很简略，胶体金的颗粒巨细较共同，广为选用。该法一般先将0.01%的HAuCl4溶液加热至欢腾，敏捷参加必定量1%柠檬酸三钠水溶液，开端有些蓝色，然后浅蓝、蓝色，再加热呈现赤色，煮沸7～10min呈现通明的橙赤色。各种颗粒的胶体金制备详见表5-2。

  依照Frens法还能够制备出其它不同颗粒巨细的胶体金出来。许多研讨证明用该法制备胶体金时金颗粒的巨细是柠檬酸三钠用量的函数，根本的规则是柠檬酸三钠用量多，胶体金颗粒直径小，柠檬酸三钠用量越少，腔体金颗粒直径越大。

  该法是以1982年Muhlpfordt法为根底，1985年Slot与Geuze对该法进行了改进，特色是经过改动鞣酸的用量制备出多种颗粒直径的胶体金，并且颗粒的直径均匀共同，很适合于双标及多标研讨。制备3nm、5nm、10nm、15nm的胶体金颗粒见表5-3。

  （2）将制造好的A、B两液在水浴内加热到60℃，并经过控温设备使温度保持稳定。

  （3）在电磁拌和器上拌和A液敏捷参加B液，持续加热直至胶体金变成葡萄酒色，时刻大约7～10min。在A、B两液混合后可见溶液当即变成蓝色，大约1～3min就变成赤色。

  用鞣酸—柠檬酸三钠复原法，柠檬酸三钠首要为复原剂，而鞣酸则有两层效果，一是复原效果，二是维护效果，操控“晶核”的构成进程，也就是说鞣酸的用量多少决议胶体金颗粒的巨细构成，因而改动鞣酸的用量就能改动胶体金的颗粒巨细，到达制备不同直径颗粒的胶体金之意图。

  （3）用20KC、125w超声波探头浸入溶液内进行超声振动，由此法制得的胶体金颗粒为6～10nm。

  （3）在拌和下，敏捷参加新鲜制造的硼氢化钠水溶液（0.5mg/ml）0.4ml,一般重复参加3～5次，直至溶液的兰紫色变为橙赤色为至。然后再拌和5min，取得的金颗粒直径在2～5nm之间。

  （3）敏捷参加4ml1%柠檬酸三钠水溶液，5～7min呈现通明的橙赤色。